自新冠肺炎疫情暴发以来，国内进入常态化疫情防控状态，但全球疫情仍在持续蔓延，目前已扩散到全球200多个国家和地区^[1]。随着气温的下降，新型冠状病毒的活性得以增强，当温度低于3 ℃时，平均温度与新冠肺炎病例数呈正线性关系^[2]。生鲜食品冷链过程中也存在新型冠状病毒传播的风险。有研究表明，将新型冠状病毒添加到鸡肉、三文鱼和猪肉中并在4 ℃标准冷藏和−20 ℃标准冷冻21 d后，新型冠状病毒的传染性仍未下降^[3]。在2020年6月北京新发地疫情和2020年7月大连疫情中，于进口冷链食品相关的环境拭子样本检测中均显示新型冠状病毒核酸阳性；在2020年9月青岛疫情中，进口冻鳕鱼外包装也分离出新型冠状病毒^[4]。由此可见，关于生鲜食品冷链过程中消毒杀菌技术的研究十分关键。

包装内的食品常采用的杀菌方法主要分为加热杀菌和非加热杀菌两大类，其中非加热杀菌（冷杀菌）即不用热能来杀死微生物，而是通过物理或化学的方法进行杀菌，在保证食品在微生物方面安全性的同时保持食物固有的营养成分^[5]。冷杀菌技术包括超高压杀菌、臭氧杀菌、脉冲强光杀菌、紫外线杀菌、辐照杀菌等新型杀菌技术^[6]。现行冷链食品装卸、运输等物流过程中常用醇类、过氧化物类、季铵盐类以及含氯消毒剂进行生鲜食品外包装消毒^[7]。然而，过度接触消毒化学品可能会导致意想不到的人类健康风险^[8]，并且被洗掉的大部分消毒剂可能存在于城市废水中，并且延伸到水生环境^[9]。因此，探究可同时用于食品表面及外包装的相对安全高效消毒杀菌技术有利于生鲜食品在冷链过程中的疫情防控。

针对现行冷链食品消毒技术的不足，本文综述了可同时用于生鲜食品表面及外包装的相对安全高效的消毒杀菌技术，且基于不同杀菌方法对新型冠状病毒的灭活作用及其在食品冷链过程中的应用，本文目前重点研究臭氧杀菌技术和紫外线杀菌技术。

1.   臭氧杀菌技术

1.1   臭氧杀菌技术的工作机理

臭氧（O₃）是氧（O₂）的同素异形体，分子量为48，常温下是一种不稳定且具有特殊刺激性气味的淡蓝色气体。液态臭氧为深蓝色，比重为1.71，熔点为−183 ℃；固态臭氧为紫黑色，熔点为−251 ℃，气态臭氧的临界温度为−12 ℃，沸点为−119 ℃^[10-11]。臭氧化学性质活泼具有极强的氧化能力，可以同细菌的细胞壁中存在的蛋白质等有机物发生化学反应，使细胞壁通透性增加，细胞内容物流出，臭氧在破坏和分解细胞壁后迅速进入细胞，氧化细胞内酶或核糖核酸（Ribonucleic Acid，RNA）、脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleic Acid，DNA），从而生成死菌原体，故臭氧对病毒、细菌和霉菌等微生物具有很好的灭活效果^[12]。

1.2   臭氧杀菌技术对新型冠状病毒的灭活作用

在疫情阶段，探究臭氧杀菌技术对新型冠状病毒的灭活作用在保证生鲜食品冷链过程中的安全方面至关重要，许多学者在臭氧杀菌技术对新型冠状病毒的灭活作用、传播速度等方面进行了研究。Tizaoui等^[13]研究发现臭氧可能是对抗新型冠状病毒的有效氧化剂，臭氧可以攻击病毒尖峰和包膜的蛋白质和脂质，从而破坏病毒的完整性，抑制病毒感染，臭氧灭活病毒的潜在攻击部位如图1所示^[13]。Fernández-Cuadros等^[14]研究发现臭氧可以直接或间接氧化灭活病毒，并可以刺激细胞和体液免疫系统，在早期新冠肺炎感染阶段有用，臭氧可以改善气体交换，减少炎症，并调节抗氧化系统，因此它可用于过度炎症或细胞因子风暴期，以及低氧血症和/或多器官衰竭期。Wang等^[15]研究表明臭氧可以通过调节一种负责产生白细胞介素IL-1β和白细胞介素IL-18的细胞溶质复合物来显示其抗炎活性，它可以保护受新型冠状病毒肺炎影响的患者肺部免于发生缺血再灌注损伤。Ran等^[16]使用基本繁殖数(R0)对新冠肺炎的传染性进行了量化，根据中国国家环境中心获得的2019 年 12 月 10 日~ 2020 年 2 月 29 日期间1642个站的空气污染物（包括臭氧在内的其他标准污染物）监测数据，提取污染物的值，并通过有温度和绝对湿度调整的回归分析来探索R0和每种污染物之间的关联，研究发现新冠肺炎R0与每日1 h最大臭氧浓度呈负相关，如图2所示^[16]，表明环境臭氧与降低新冠肺炎传播率有关。Cattel等^[17]对2011年1月~2020年7月发表的280篇关于臭氧治疗方面的文章进行研究，通过分析臭氧作为辅助手段联合药物进行治疗时得到的有益效果，提示了一种全身臭氧治疗的新的免疫治疗方法，提出了对于新型冠状病毒肺炎患者，全身臭氧治疗联合抗病毒药物是合理可行的。

图  1  臭氧灭活病毒的潜在攻击部位

Figure  1.  Potential attack site of ozone inactivation virus

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图  2  基本繁殖数和每日1 h最大臭氧浓度的变化关系

Figure  2.  Relationship between basic reproduction number and maximum ozone concentration per 1 h per day

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1.3   臭氧杀菌对冷链过程中生鲜产品保鲜效果的影响

在臭氧杀菌技术对新型冠状病毒有效灭活的基础上，探究其对冷链过程中生鲜产品保鲜效果的影响更有利于臭氧杀菌技术在疫情阶段的实施。臭氧杀菌技术因具有高效、无残留以及经济适用性的特点，被广泛应用于食品行业^[18]。肖岚等^[19]将冷却猪肉放置在臭氧保鲜液中浸泡2 min后置于（3±0.5）℃环境中冷藏，试验结果表明经臭氧处理可有效抑制冷却猪肉中细菌的生长繁殖，从而改善冷却猪肉在贮藏期的保鲜效果，且臭氧浓度在4 mg/L时保鲜效果最佳。石英子等^[20]将新鲜鸡胸肉放置在5 mg/L的臭氧处理45 min后置于4 ℃冷藏，试验结果表明5 mg/L的臭氧抑菌效果显著且可使鸡胸肉保鲜期延长至7 d。李梦钗等^[21]将新鲜草莓经不同浓度的臭氧处理后放置于−1~1 ℃的保鲜库中储存，试验结果表明经浓度为20 mg/kg臭氧处理后的草莓储藏期可达到30 d左右，果实色泽鲜艳，有效保持了其原有的品质。Glatman等^[22]研究发现经臭氧处理冷冻前的罗非鱼，可使冷冻罗非鱼的贮藏寿命延长12 d，在0 ℃贮藏条件下提高了罗非鱼的品质。Cárdenas等^[23]研究了气态臭氧对牛肉品质的影响。在0和4 ℃时表面颜色不变的牛肉样品中，141.12 mg/m³的臭氧剂量确保了大肠杆菌的数量下降，且随着温度的降低牛肉中微生物大量减少。Tabakoglu等^[24]研究发现将桑葚放置在臭氧浓度为5.14 mg/m³温度为（2±1）℃的冷室中，可有效降低大肠杆菌的数量，具有良好的保鲜效果。综上所述，臭氧杀菌技术可有效抑制冷链过程中生鲜食品表面微生物的生长繁殖，具有保证冷链过程中生鲜食品品质、延长生鲜食品贮藏期的特点。

1.4   臭氧杀菌技术对冷链过程中食品外包装消毒的有效性及应用现状

臭氧的强氧化作用使其成为了一种新型消毒剂与杀菌剂^[25]，对装载于冷藏集装箱内的进境食用动物产品，采用ZA-YD-20G型臭氧发生器向冷藏集装箱内输入10 g臭氧1 h并静置15 min后可使动物产品外包装纸箱表面自然菌杀灭率达到99.7%^[26]。采用XFG-K30开式臭氧发生器与微机控制进行食品冷库消毒，可使真菌和细菌杀灭率控制在80%以上^[27]。20世纪80年代末，日本夏普公司将电子自动除臭器（由交流供电的微型臭氧发生器）安装在冰箱内构成的新一代“无臭冰箱”，可有效杀灭多种细菌病毒，延长食品贮藏期^[28]。此外，国内目前已有企业将臭氧杀菌技术应用在生鲜产品的保鲜及冷冻包装前的消毒过程中^[29]。由于臭氧具有一定的毒性，即当臭氧浓度大于200 μg/m³时会引起人眼、鼻、喉刺痛；臭氧浓度在1300~2000 μg/m³时会引起呼吸困难；臭氧浓度在2000~4000 μg/m³时会使人眼和呼吸器官有急性灼烧感，以及神经发生障碍等现象^[30]。故涉及臭氧的过程中应采用适当的预防措施进行规划，防止出现明火或人员操作过程中暴露于臭氧的现象发生^[31]。综上所述，臭氧杀菌技术对冷链过程中生鲜食品外包装消毒具有积极作用，且可用于冷库、冰箱等生鲜食品低温储藏场所的消毒，但由于臭氧毒性的限制，应用时能够加速臭氧覆盖与挥发时间的消毒杀菌技术还需进一步研究。

2.   紫外线杀菌技术

2.1   紫外线杀菌技术的工作机理

紫外线可分为波长为315~400 nm的长波紫外线（Ultraviolet A，UVA），波长为280~315 nm的中波紫外线（Ultraviolet B，UVB），波长为200~280 nm的紫外线照射区（Ultraviolet C，UVC），以及波长为100~200 nm的真空紫外线区（Ultraviolet D，UVD），其中UVA波长最长，能量最低；UVB可导致皮肤晒黑、晒伤和皮肤癌；UVC具有适合微生物灭活的高能量；真空紫外线可被所有物质吸收^[32]。UVC的杀菌机制是对RNA和DNA进行破坏，往往会导致核酸链中嘧啶残基之间形成二聚体，这种修饰的结果是环丁烷嘧啶二聚体（Cyclobutane Pyrimidine Dimmers，CPDs）的产生导致DNA分子的变形，这可能导致细胞复制的缺陷并导致细胞死亡^[33]。有研究表明，260~270 nm的紫外线波长能量能够被微生物的核酸强烈吸收，可以有效消灭微生物^[34-35]。故采用UVC进行消毒杀菌可起到良好的灭杀效果。

2.2   紫外线杀菌技术对新型冠状病毒的灭活作用

Kitagawa等^[36]研究发现波长为222 nm的紫外线在照射强度为0.1 mW/cm²条件下照射30次可将新型冠状病毒的活菌数降低至无法检测的水平，研究结果表明222 nm紫外线照射对新型冠状病毒的灭活有效，紫外线杀菌技术可用于新冠肺炎的感染预防和控制。Heilingloh等^[37]研究发现波长为254 nm，照射剂量为1048 mJ/cm²的紫外线，照射浓度为5×10⁶ TCID₅₀/mL的新型冠状病毒9 min可致其完全失活，研究结果表明紫外线可以对高滴度的新型冠状病毒起到快速灭活作用。Gerchman等^[38]通过研究发现波长在286 nm的紫外线发光二极管可使冠状病毒得到有效灭活。Inagaki等^[39]研究发现强度为3.75 mW/cm²的紫外线持续辐射60 s能够使新型冠状病毒失活，并中断病毒RNA的转录、翻译和复制。Rathnaainghe等^[40]研究了由两个高功率紫外线汞灯相对垂直配置以及一个简单的机动传送系统共同制成的紫外线照射系统，研究结果表明波长为254 nm，照射剂量为1.5 J/cm²的紫外线照射每2.5 cm²接种的106点状单位新型冠状病毒的N95口罩120 s可导致新型冠状病毒减少100%。

2.3   紫外线杀菌对冷链过程中生鲜食品保鲜效果的影响

紫外线杀菌技术具有环保简便且不会造成二次污染的优点，被广泛应用于食品贮藏、物质养护及水质洁净等方面^[41]。许多学者对此进行了研究。贺莹^[42]将波长为253.7 nm的紫外线杀菌灯照射抽真空的带鱼样品15 min后对试验样品进行气调包装，并置于4 ℃条件下贮藏，试验结果表明使用紫外线杀菌技术结合气调处理的带鱼其贮藏期可延长至15 d。Hassan等^[43]研究了添加剂量分别为3.5、7.0 和10 kJ/m²的紫外线照射后对4 ℃冷藏情况下辣椒、茴香和香菜中微生物、生物活化性化合物和抗氧化活性的影响，试验结果表明辐射量的增加可有效抑制微生物的生长，提高辣椒、茴香和香菜的抗氧化活性，故紫外线辐射杀菌处理可用于提高食品营养价值，延长货架期。González-Aguilar等^[44]研究了不同紫外线照射时间对鲜切芒果5 ℃冷藏情况下的影响，研究发现紫外线辐照提高了鲜切芒果的抗氧化能力，但其内的维生素C含量会随贮藏时间的延长而降低。Wang等^[45]将鲜切莲藕分别进行1、5、10、20和40 min的紫外线辐照，并将紫外线辐照后的鲜切莲藕置于4 ℃冷藏保存8 d，发现1.5~3 kJ/m²强度的紫外线对鲜切莲藕的褐变度具有显著的抑制作用，可提高鲜切莲藕的品质。综上所述，紫外线杀菌技术可有效抑制冷链过程中生鲜食品微生物的生长，提高鲜切果蔬的抗氧化能力，延长货架期。

2.4   紫外线杀菌技术对冷链过程中食品外包装消毒的有效性及应用现状

紫外线杀菌技术可用于对空气、物体表面、水等介质的灭菌和消毒^[46]。15 W紫外线在移动的包装材料上方20 mm处进行垂直照射，完全灭活0~10 个/cm²的细菌仅需4.8 s，完全灭活100 个/cm²的细菌仅需5.6 s ^[47]。此外，紫外线杀菌技术也广泛应用于冷库、冰箱等食品低温贮藏的场所，如搭载异形紫外线杀菌消毒灯的冰箱，可对水、空气和物品表面等进行杀菌消毒^[48]。在冷库中常用0.33~3 W/m³紫外光连续照射6 h以达到杀灭微生物的作用^[49]。紫外线杀菌技术的应用限制主要集中在两方面，一个是紫外线波长对人的危害，一个是紫外线引起的食品有机分子结构破坏。Buonanno等^[50]研究发现不管细菌的耐药性如何，在200~222 nm波长范围内的远紫外线均可以有效杀死细菌，并且不会对人产生与常规杀菌紫外线照射相关的皮肤损伤效应。远紫外线灯可能被证明是对总有人在的空间进行消毒的理想选择^[51]。由于紫外线的穿透力低，需要更高的剂量来处理大面积的食品，长时间暴露在紫外线下会影响食物的质量，因此，紫外线的照射剂量和暴露时间还需进一步优化^[52]，以防止食品有机分子结构被破坏而造成的食品脂肪氧化、维生素损失等现象。

3.   结论与展望

臭氧杀菌技术和紫外线杀菌技术对新型冠状病毒灭活有效，且二者在生鲜食品表面及外包装具有良好的杀菌效果，在消毒的同时还能起到延长贮藏时间的作用，可用于疫情下生鲜食品在冷链过程中的消毒杀菌，为疫情防控提供帮助。但由于臭氧和紫外线的物理化学特性限制，使臭氧杀菌技术和紫外线杀菌技术在疫情期间的使用具有一定的局限性，为此可从以下几个方面进行研究：

a. 由于臭氧具有一定的毒性且易爆炸，故在生鲜食品冷链运输过程中使臭氧充分覆盖生鲜食品外包装并加速臭氧挥发的技术有待进一步研究。

b. 紫外线波段会对人体产生不同程度的危害，紫外光用于生鲜产品低温贮藏时会造成食品有机分子结构的破坏，故接下来的研究可针对紫外线波长、照射距离、照射强度以及紫外线设备等方面进行改进。

c. 考虑到现阶段的疫情形势，其他冷杀菌技术如辐射杀菌、超高压杀菌等杀菌消毒技术对新型冠状病毒的灭活作用还有待研究，进而达到切断新型冠状病毒传播途径，保证冷链过程中生鲜食品的安全，并有效控制疫情的目的。